Калькулятор закона Бугера – Ламберта – Бера
Выберите неизвестную величину и введите три другие. Показание прибора можно ввести как оптическую плотность (поглощение) или пропускание в процентах, концентрацию — в моль/л, ммоль/л или мкмоль/л. Вместе с результатом показано соответствующее пропускание.
Работает в браузере: всё, что вы вводите, никуда не отправляется.
Как пользоваться
- Выберите неизвестную: оптическую плотность, концентрацию, коэффициент поглощения или толщину слоя.
- Введите показание прибора как оптическую плотность или пропускание в процентах.
- Введите остальные величины и выберите единицу концентрации.
- Смотрите результат и пропускание.
Формулы
- A = ε × l × c
- c = A ÷ (ε × l), ε = A ÷ (l × c), l = A ÷ (ε × c)
- T = 10⁻ᴬ в процентах; A = −lg(T ÷ 100), если T в процентах.
Пример расчёта
НАДН поглощает при 340 нм с ε = 6220 л/(моль·см). Раствор 100 мкмоль/л в кювете 1 см: A = 6220 × 1 × 0,0001 = 0,622, пропускание 23,88 %.
Обратная задача: проба показывает A = 0,5, значит c = 0,5 ÷ (6220 × 1) = 0,0000804 моль/л = 80,3859 мкмоль/л.
Советы
- Обнуляйте прибор по холостой пробе — растворителю без вещества.
- Лучшая точность — при A от 0,1 до 1.
- ε зависит от длины волны. Берите значение для той длины волны, на которой измеряете.
Частые вопросы
Что говорит закон Бугера – Ламберта – Бера?
Оптическая плотность пропорциональна концентрации и толщине слоя, A = ε × l × c. ε — молярный коэффициент поглощения в л/(моль·см), l — толщина слоя (длина кюветы) в см, c — концентрация в моль/л. A — безразмерная.
Как связаны оптическая плотность и пропускание?
A = −lg T, где T — доля. Пропускание 100 % — это A = 0, 10 % — A = 1, 1 % — A = 2. Калькулятор переводит в обе стороны.
Почему ε в л/(моль·см)?
Чтобы A = εlc была безразмерной при l в сантиметрах и c в моль/л. Стандартная кювета — 1 см, поэтому это значение толщины стоит по умолчанию.
Когда закон не выполняется?
При больших концентрациях (часто выше примерно 0,01 моль/л), при оптической плотности выше 1,5–2, в мутных и флуоресцирующих образцах и при немонохроматическом свете. Разбавьте пробу, чтобы остаться в линейной области.