Calculadora de la ley de Beer-Lambert
Elige la incógnita e introduce las otras tres magnitudes. La lectura del espectrofotómetro puede ser absorbancia o transmitancia en porcentaje, y la concentración se da en mol/L, mmol/L o µmol/L. Junto al resultado se muestra la transmitancia correspondiente.
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Cómo se usa
- Elige la incógnita: absorbancia, concentración, absortividad molar o paso óptico.
- Introduce la lectura como absorbancia o como transmitancia en porcentaje.
- Introduce el resto de magnitudes y elige la unidad de concentración.
- Consulta el resultado y la transmitancia.
Fórmulas
- A = ε × l × c
- c = A ÷ (ε × l), ε = A ÷ (l × c), l = A ÷ (ε × c)
- T = 10⁻ᴬ en porcentaje; A = −log(T ÷ 100) si T está en porcentaje.
Ejemplo resuelto
El NADH absorbe a 340 nm con ε = 6220 L/(mol·cm). Una disolución de 100 µmol/L en una cubeta de 1 cm: A = 6220 × 1 × 0,0001 = 0,622, así que pasa el 23,88 % de la luz.
Al revés: una muestra da A = 0,5, así que c = 0,5 ÷ (6220 × 1) = 0,0000804 mol/L = 80,3859 µmol/L.
Consejos
- Haz el cero con un blanco del disolvente para que A mida solo la sustancia.
- La mejor precisión está entre A = 0,1 y 1.
- ε depende de la longitud de onda. Usa el valor de la longitud de onda a la que mides.
Preguntas frecuentes
¿Qué dice la ley de Beer-Lambert?
La absorbancia es proporcional a la concentración y al paso óptico, A = ε × l × c. ε es el coeficiente de absortividad molar en L/(mol·cm), l el paso óptico (ancho de la cubeta) en cm y c la concentración en mol/L. A no tiene unidades.
¿Qué relación hay entre absorbancia y transmitancia?
A = −log T, con T como fracción. Una transmitancia del 100 % es A = 0; del 10 %, A = 1; del 1 %, A = 2. La calculadora convierte en los dos sentidos.
¿Por qué ε va en L/(mol·cm)?
Para que A = εlc no tenga unidades con l en centímetros y c en mol/L. La cubeta estándar mide 1 cm, por eso es el paso óptico por defecto.
¿Cuándo deja de cumplirse la ley?
A concentraciones altas (a menudo por encima de unos 0,01 mol/L), con absorbancias superiores a 1,5–2, en muestras turbias o fluorescentes y con luz no monocromática. Diluye la muestra para quedarte en la zona lineal.